ریکومبیننٹ اسپائک پروٹین پر مبنی پورسائن ایکیوٹ ڈائریا سنڈروم کورونا وائرس IgG اینٹی باڈی کا پتہ لگانے کے لیے بالواسطہ ELISA طریقہ کی ترقی

پورسائن ایکیوٹ ڈائریا سنڈروم کورونا وائرس (SADS-CoV) ایک نیا دریافت شدہ پورسائن اینٹرک پیتھوجینک کورونا وائرس ہے جو نوزائیدہ سوروں میں پانی والے اسہال کا سبب بن سکتا ہے اور سور کی صنعت کو اہم معاشی نقصان پہنچا سکتا ہے۔فی الحال، SADS-CoV انفیکشن اور ویکسین کی تاثیر کا جائزہ لینے کے لیے کوئی مناسب سیرولوجیکل طریقہ نہیں ہے، اس لیے اس کمی کو پورا کرنے کے لیے ایک مؤثر انزائم سے منسلک امیونوسوربینٹ پرکھ (ELISA) استعمال کرنے کی فوری ضرورت ہے۔یہاں، انسانی IgG Fc ڈومین کے ساتھ ملا ہوا SADS-CoV اسپائک (S) پروٹین کا اظہار کرنے والا ایک ریکومبیننٹ پلازمیڈ دوبارہ پیدا کرنے والے بیکولووائرس کو تیار کرنے کے لیے بنایا گیا تھا اور HEK 293F خلیوں میں ظاہر کیا گیا تھا۔S-Fc پروٹین کو پروٹین G رال سے پاک کیا جاتا ہے اور اینٹی ہیومن Fc اور اینٹی SADS-CoV اینٹی باڈیز کے ساتھ رد عمل کو برقرار رکھتا ہے۔پھر S-Fc پروٹین کا استعمال بالواسطہ ELISA (S-iELISA) کو تیار کرنے اور S-iELISA کے رد عمل کے حالات کو بہتر بنانے کے لیے کیا گیا۔نتیجے کے طور پر، 40 SADS-CoV منفی سیرا کی OD450nm قدر کا تجزیہ کرکے جس کی تصدیق امیونو فلوروسینس پرکھ (IFA) اور ویسٹرن بلوٹنگ سے ہوئی، کٹ آف ویلیو 0.3711 ہونے کا تعین کیا گیا۔S-iELISA کے اندر اور اس کے درمیان 6 SADS-CoV مثبت سیرا کے تغیرات کا گتانک (CV) سب 10% سے کم تھے۔کراس ری ایکٹیویٹی ٹیسٹ سے پتہ چلتا ہے کہ S-iELISA دوسرے پورسائن وائرس سیرا کے ساتھ کوئی کراس ری ایکٹیویٹی نہیں ہے۔اس کے علاوہ، 111 طبی سیرم کے نمونوں کی کھوج کی بنیاد پر، IFA اور S-iELISA کی مجموعی اتفاقی شرح 97.3% تھی۔سیرم کی 7 مختلف OD450nm قدروں کے ساتھ وائرس کو نیوٹرلائزیشن ٹیسٹ سے ظاہر ہوا کہ S-iELISA کے ذریعے دریافت کی گئی OD450nm ویلیو وائرس نیوٹرلائزیشن ٹیسٹ کے ساتھ مثبت طور پر منسلک تھی۔آخر میں، S-iELISA 300 پگ فارم سیرم کے نمونوں پر انجام دیا گیا۔دیگر پورسائن انٹرو وائرسز کی کمرشل کٹس نے ظاہر کیا کہ SADS-CoV، TGEV، PDCoV اور PEDV کی IgG مثبت شرحیں بالترتیب 81.7%، 54%، اور 65.3% تھیں۔6%، بالترتیب۔نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ S-iELISA مخصوص، حساس، اور تولیدی ہے، اور اسے سور کی صنعت میں SADS-CoV انفیکشن کا پتہ لگانے کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔یہ مضمون کاپی رائٹ کے ذریعے محفوظ ہے۔جملہ حقوق محفوظ ہیں.


پوسٹ ٹائم: جون 22-2021